菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物,它是由数以万计的相同细菌聚集而成的,故又有细菌集落之称。

中文名
菌落
外文名
colony
介绍
细菌围绕母细胞形成的子细胞集团
环境
固体培养基上(内)
温度
46℃

1简介

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菌落,通常是细菌在固体培养基上(内)生长发育,形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞的集团,称之为菌落。

菌落菌落

菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内,所含能于某种周体培养基上,在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。

菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记,也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态。以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据。

2类型

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细菌在平面培养基上形成各种型的集落,称为群落。菌落形态不仅因细菌的种类而有不同,即在同一种菌中,也会因遗传上的变化和培养条件的不同而发生变化。但对它们之间的相互关系和转变,仍有很多不明之处。已知在肺炎双球菌中,可由DNA引起性状转化,在布鲁氏杆菌属(Brucella)中则可因突变而引起性状变异。这种变化和细胞抗原抗体反应的特异性以及其它的生理性质变化具有密切关系。一般了解最清楚的是S-R变异。粘稠的细菌菌落Mmuc-oid之缩写)型,往往有不透明的菌落,与细菌产生的荚膜物质的量有关。也有S型转化为R型的情况。Ddwarf的缩写)型为小型的菌落,但与细菌滤过性形态有密切关系。

3形态

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菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等。每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下,菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。

细胞形态是菌落形态的基础,菌落形态是细胞形态在群体集聚时的反映。细菌是原核微生物,故形成的菌落也小;细菌个体之间充满着水分,所以整个菌落显得湿润,易被接种环挑起;球菌形成隆起的菌落;有鞭毛细菌常形成边缘不规则的菌落;具有荚膜的菌落表面较透明,边缘光滑整齐;有芽孢的菌落表面干燥皱褶;有些能产生色素的细菌菌落还显出鲜艳的颜色。

4培养

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菌落是生长在固体培养基上,由单个细胞繁殖形成的、肉眼可见的微生物群体。

菌落菌落

将分散的细胞或孢子被稀释到一定程度,接种到培养基上,在一定培养条件下,使其生长繁殖。由于细胞受到固体培养基表面或深层的限制,子代菌体常以母细胞为中心聚集在一起,形成具有一定形态结构的子细胞群体。每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。

如果细菌菌体接种于半固体培养基中或液体培养基中,是不能形成菌落的。在半固体培养基中,接种的无鞭毛的细菌只沿着穿刺线生长,而有鞭毛的细菌可在穿刺线的周围扩散生长。

细菌菌体接种于液体培养基中,细菌生长后能使液体培养基变得混浊。混浊情况视细菌对氧气需求的不同而有所不同:好氧菌仅使上部培养液混浊,厌氧菌使底部培养液混浊,兼性厌氧菌使培养液上下均匀混浊;有的细菌可在培养液表面形成菌环或菌膜,或在底部产生沉淀。

操作方法

根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。

操作要点

1.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落混淆而影响计数观察。

2.为使菌落能在平板上均匀分布,检液加入平皿后,应尽快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min,以防止细菌有所死亡或繁殖。

3.培养温度一般为37℃(水产品的培养温度,由于其生活环境水温较低,故多采用30℃)。培养时间一般为48h,有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度,琼脂平板培养48h后,培养基失重不应超过15%

4.为避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆,不易分辨,可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板,不经培养,而于4℃环境中放置,以便计数时作对照观察。在某些场合,为了防止食品颗粒与菌落混淆不清,可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培养后菌落呈红色,易于分别。

注意事项

1. 操作要快而准,包括材料、加样、倒培养基。

2. 吸液体时液体不能进入吸头。

3. 样品稀释时一定要混匀。

4. 倒培养基前,瓶口要过火焰。

5. 一定要有空白对照。

6. 培养基温度控制,培养基薄厚。

7. 检测时一定要使平皿完全暴露于空气中。

词条图片

参考资料

[添加]
[1].新华网:鲜榨豆浆被曝有“毒” 常温放6小时菌落增10倍

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  • 更新时间:2015-06-04
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